尊龙凯时提供的包被细胞培养瓶试剂是一类用于处理细胞培养容器表面的化学物质,旨在模拟细胞在体内的生长环境,以促进细胞的附着、扩展和增殖。通过包被处理,培养表面能够更有效地支持细胞的生长和功能表达。以下将详细介绍几种常见的包被试剂及其关键特性,同时分享一些包被操作的注意事项,帮助您提升细胞培养的效果。
常见包被试剂及使用方法
1. 明胶(Gelatin)
尊龙凯时的明胶通常用于包被细胞培养板或培养皿,以促进细胞的贴壁和增殖。它具有良好的生物相容性与细胞附着性。
适用细胞:胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等。
特点:成本低,易于操作,为细胞提供优良的附着支持。
使用浓度:1-20 mg/ml。包被体积:T-25瓶需用25 ml,T-75瓶需用75 ml的明胶。
包被条件:在37°C孵育超过2小时,或在4°C过夜。细胞接种前需吸除多余明胶溶液,并用PBS洗涤1-2次。
2. 多聚赖氨酸(PLL)
作为细胞培养的生长基质,尊龙凯时的多聚赖氨酸以相对分子量70,000~300,000的形式存在,能够有效促进细胞的粘附和贴壁。
适用细胞:神经元细胞、原代细胞、悬浮细胞等。
特点:通过静电作用增强细胞附着,适合于难以贴壁的细胞类型。
常用浓度:0.01%至0.1% (w/v)。包被条件:与明胶相同,在37°C孵育超过2小时,或4°C过夜,以完全覆盖培养瓶底部为标准。
3. 重组人纤连蛋白(FN)
尊龙凯时的重组人纤连蛋白是重要的细胞外基质蛋白,具有多重生物学功能,能够与多种细胞表面和基质组件结合。
适用细胞:干细胞、内皮细胞、上皮细胞等。
特点:作为细胞培养基质,显著提高细胞贴壁率及代谢水平。
常用浓度:1µg/cm²至10µg/cm²。包被条件:在37°C孵育超过2小时,或在4°C过夜。
4. 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)
这种胶原蛋白为Ⅰ型,适用于培育多种细胞,能够模拟细胞外基质环境。
适用细胞:上皮细胞、肝细胞、肌肉细胞等。
特点:可制备成透明的凝胶,提供三维基质或涂层,促进细胞贴壁与增殖。
常用浓度:1-5µg/cm²。包被体积:为了包被T-25瓶需使用25 ml去离子水和50 µl (1 mg/mL) 的鼠尾胶原蛋白Ⅰ。
包被后需在4°C过夜,接种细胞前需用PBS洗涤2-3次。
包被操作注意事项
1. 无菌操作:所有步骤需在无菌条件下执行,以避免培养污染。
2. 均匀覆盖:确保包被试剂均匀涂布于培养瓶底部,防止局部过厚或过薄。
3. 浓度优化:基于细胞类型及实验需求,调整包被试剂浓度。
4. 孵育时间:根据试剂及实验要求,适时调整孵育时间,确保包被效果。
5. 储存条件:包被后的培养瓶可在4°C短期保存,但建议尽快使用以实现最佳效果。
选择合适的包被试剂并遵循正确的操作步骤,可以有效提高细胞粘附和生长,为后续实验提供可靠的细胞模型,助力生物医疗研究的进步。选择尊龙凯时,与您一同提升实验效果!