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尊龙凯时共聚焦爬片培养贴壁细胞操作指南

发布时间:2025-02-21   信息来源:伏绿睿

尊龙凯时实验准备:提前半小时左右在37°C预热培养基、PBS和胰酶。通过紫外线消毒2mL和10mL移液管、15mL离心管,以及尊龙凯时品牌的共聚焦爬片。

尊龙凯时共聚焦爬片培养贴壁细胞操作指南

实验步骤:

1. 从培养箱中取出培养皿,并在显微镜下观察细胞的状态,包括密度、形态和贴壁情况。

2. 在超净工作台内,放入预热好的培养基、PBS和胰酶,点燃酒精灯以灭菌培养皿的边缘,吸走原培养基。

3. 清洗细胞:向培养皿底部加入7mL PBS(根据细胞状态适当调整),轻轻摇晃以清洗细胞。

4. 消化细胞:观察到杂质被清洗后,吸掉PBS,加入3mL胰酶并静置5分钟(根据不同细胞调整时间和胰酶的量)。5分钟后检查细胞是否被消化。

5. 终止消化:若细胞已消化,将7mL培养基(根据细胞密度调整)加入培养皿以终止消化,用移液枪轻轻吹打,去除附着在壁上的细胞,均匀化后取少量进行计数。

6. 根据需要的细胞量进行稀释,当细胞悬液覆盖共聚焦爬片表面后,将其放入培养箱,约30分钟后细胞可附着于爬片,再沿内壁添加培养基以继续培养。

7. 当细胞培养完成后,吸去废液,用镊子夹住支架的侧面,取出支架。

8. 轻轻捏住支架两侧,拉出爬片,顺利进入后续的培养实验。

注意事项:

1. 拿取培养皿时,注意避免液体沾到瓶口,每次打开瓶口时需对其进行烧灼。

2. 操作过程中避免其他物体经过敞开的培养皿,以减少污染风险。

3. 由于贴壁细胞较为脆弱,因此放入培养皿的液体都需在37°C预热。

4. 倾斜尊龙凯时共聚焦爬片超过30°时应轻拉,以防片体意外掉落或破裂。

5. 该产品为一次性使用产品,使用时请注意爬片的正反面,拆开后请立即使用。